病的二3株菌筛鉴定青枯选及抑制烟草放线

2.2拮抗菌抑菌谱测定

3株拮抗放线菌菌株抑制其他病原菌的抑制烟草结果如表1所示，3株放线菌的青枯固体菌块和发酵液对烟草猝倒病原菌均无抑制效果，菌株SC-105-B-10的株放发酵液和菌株L2-003-A-5的固体菌块对烟草黑胫病原菌具有较弱的抑制效果；3株菌的固体菌块和发酵液对赤星病原菌均有抑制效果，对辣椒、线菌番茄和马铃薯等茄科类植物青枯病原菌均有抑制作用，筛选即3株放线菌对茄科类植物青枯病原菌具有广谱的抑制烟草拮抗作用。

2.3菌株SC-105-B-10的青枯鉴定

2.3.1菌株的SC-105-B-10形态特征

菌株SC-105-B-10在扫描电镜下的形态如图2所示，菌株的株放气生菌丝明显呈短直链状，孢子链的线菌长度不一；孢子呈短圆柱形，四周有内陷现象。筛选气生菌丝生长能力强，抑制烟草基内菌丝错综生长，青枯孢子链密集。株放将菌株SC-105-B-10在供试的线菌8种培养基上进行培养和观察，发现在马铃薯浸汁琼脂和营养琼脂中长势很弱，筛选但在高氏一号琼脂上长势较好(图3)；在其他8种培养基上气生菌丝多呈灰白或淡黄色，基内菌丝呈灰绿色，无可溶性色素(表2)。

2.3.2菌株SC-105-B-10的生理生化特征

通过对各拮抗菌株生理生化特征的检测，获得如表3所示的实验结果。菌株SC-105-B-10的pH生长范围是6～9，pH7～8时长势最好，在低于pH6和高于pH9的条件下不能生长。菌株SC-105-B-10耐受10%NaCl；可生长的温度范围为25～45℃，最适温度为30℃。淀粉水解试验、凝固牛奶、纤维素、油脂、产H2S、过氧化氢酶和甲基红反应阳性，液化明胶、硝酸盐还原和苯丙氨酸脱氢酶反应呈阴性。

2.3.3菌株SC-105-B-10的16SrRNA基因部分序列分析

测序结果表明菌株SC-105-B-10的16SrRNA基因部分序列长度为1492bp，在GenBank核酸登录号为KT633863。根据系统发育分析，菌株SC105-B-10属于链霉菌属(Streptomyces)，与Streptomy-cesgriseussubsp.griseusKCTC9080T、Streptomycescy-aneofuscatusNRRLB-2570T、Streptomycescinereorec-tusNBRC15395T、StreptomycesfulvorobeusNBRC15897T、StreptomycesmicroflavusNBRC13062T和StreptomycesfulvissimusDSM40593T聚为一簇，与这些菌的16SrRNA基因序列相似性均为99.7%。通过邻接法构建的基于菌株SC-105-B-10及相关菌株16SrDNA序列的系统发育树如图4所示。

综合分析多种链霉菌的特性(Rongetal,2010；黄苛等,2010；邵阳,2011；李涛等,2007)，菌株SC-105-B-10的形态特征和生理生化特征与细黄链霉菌(S.microflavus)更接近(王慧玲等,2009；Da‐vid,2011；Lanootetal,2005)，因此判断SC-105-B10是细黄链霉菌的一个菌株。

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